Реакція Фельгена (Feulgen Reaction)

Реакція Фельгена (Feulgen Reaction) – це метод визначення наявності ДНК у ядрі клітини, який був розроблений у 1924 році німецьким біологом Робертом Фельгеном. Цей метод є одним із найбільш поширених та точних способів визначення наявності ДНК у клітинах.

Процедура реакції Фьольгена починається з підготовки зрізу тканини, який потім гідролізується розведеною соляною кислотою. Це призводить до денатурації білків та гідролізу ДНК у ядрі клітини. Потім зріз обробляється реактивом Шиффа, який взаємодіє з клітинами, що залишилися в ядрі, дезоксирибонуклеотидами, утворюючи стабільний комплекс.

Внаслідок цієї реакції дезоксирибонуклеотиди в ядрі клітини забарвлюються у глибокий пурпуровий колір. При цьому кольоровість фарбування залежить від кількості ДНК в клітині.

Реакція Фьольгена має безліч застосувань у біологічних дослідженнях. Вона може використовуватися для визначення вмісту ДНК у різних типах клітин, а також для вивчення характеристик клітинного циклу та мутацій ДНК.

Крім того, метод реакції Фельгена є важливим інструментом для діагностики захворювань, пов'язаних із порушеннями ДНК, таких як рак та генетичні порушення.

Таким чином, реакція Фельгена є важливим методом у біологічних дослідженнях, який дозволяє визначати наявність ДНК у клітинах та використовувати цю інформацію для діагностики та вивчення захворювань.

Реакція Фельгена (Feulgen Reaction) є одним із найпоширеніших методів визначення наявності ДНК у клітинах. Метод був розроблений німецьким біологом Робертом Фельгеном у 1914 році і досі залишається важливим інструментом для дослідження клітинної біології.

Основна ідея реакції Фьольгена полягає у використанні реактиву Шиффа для фарбування ДНК в ядрі клітини. Для цього перед початком експерименту тканина зрізається і піддається гідролізу розведеною соляною кислотою. Цей крок необхідний видалення основних білкових компонентів, які можуть заважати виявленню ДНК.

Далі тканина обробляється реактивом Шиффа, який містить фуксин або його похідні. У присутності ДНК реактив Шиффа утворює стабільний комплекс з ниткоподібними молекулами ДНК, який в кінцевому підсумку призводить до утворення пурпурового забарвлення.

Ступінь забарвлення залежить від кількості ДНК у клітині, що робить реакцію Фельгена чутливою та точною та дозволяє використовувати її для кількісного аналізу ДНК.

Реакція Фельгена широко використовується в медицині, біології та генетиці для визначення вмісту ДНК у різних типах клітин. Цей метод можна використовувати, наприклад, для дослідження злоякісних пухлин, де зміна кількості ДНК може свідчити про наявність ракових клітин. Він також може бути корисним для вивчення геному різних організмів та виявлення мутацій та генетичних змін.

Таким чином, реакція Фельгена є важливим інструментом для дослідження клітинної біології та генетики, який дозволяє визначити наявність та кількість ДНК у клітині. Завдяки своїй чутливості та точності, цей метод продовжує залишатися популярним серед дослідників у всьому світі.

Реакція Фельгенса для визначення ДНК у клітинах. Речовина Фельгегенса є розчином, що складається з декількох компонентів. Кінцева мета полягає в тому, щоб виявити та виміряти кількість ДНК у тканинах. Основний спосіб підготовки клітин ґрунтується на процедурі фіксації, описаній у розділі 3.3.1.

Коли зразок тканини розкривається і розбавляється великою кількістю кислоти, вона руйнує колаген, який є присутнім у тканинному матриксі, щоб вивільнити клітини, які можна використовувати для аналізу. Деякі дослідження оцінюють фіксацію тканини, використовуючи оптичну мікроскопію, інші оцінюють наявність життєздатності клітин у матеріалі після дії препарату. І, нарешті, у разі кріогістологічного дослідження клітини фіксуються за субнуклеарних умов, таких як заморожування-сканування.

Після фіксування нефіксовані клітини забарвлюються реактивами Шиффа з кислотною детергентацією. Забарвлення йодом або толуїдиновим синім може супроводжувати реакцію.