Реакцията на Feulgen е метод за определяне на наличието на ДНК в клетъчното ядро, който е разработен през 1924 г. от немския биолог Robert Feulgen. Този метод е един от най-разпространените и точни начини за определяне наличието на ДНК в клетките.
Процедурата на реакцията на Feulgen започва с подготовката на тъканна секция, която след това се хидролизира с разредена солна киселина. Това води до денатурация на протеини и хидролиза на ДНК в клетъчното ядро. След това срезът се третира с реактив на Шиф, който взаимодейства с дезоксирибонуклеотидите, останали в клетъчното ядро, образувайки стабилен комплекс.
В резултат на тази реакция дезоксирибонуклеотидите в клетъчното ядро придобиват тъмно лилав цвят. В същото време цветът на петното зависи от количеството ДНК в клетката.
Реакцията на Feulgen има много приложения в биологичните изследвания. Може да се използва за определяне на съдържанието на ДНК на различни видове клетки, както и за изследване на характеристиките на клетъчния цикъл и ДНК мутации.
В допълнение, методът на реакцията на Feulgen е важен инструмент за диагностициране на заболявания, свързани с нарушения на ДНК, като рак и генетични нарушения.
По този начин реакцията на Feulgen е важен метод в биологичните изследвания, който позволява да се определи наличието на ДНК в клетките и да се използва тази информация за диагностициране и изследване на заболявания.
Реакцията на Feulgen е един от най-разпространените методи за определяне на наличието на ДНК в клетките. Методът е разработен от немския биолог Робърт Феулген през 1914 г. и остава важен инструмент за изследване на клетъчната биология.
Основната идея на реакцията на Feulgen е да се използва реагент на Шиф за оцветяване на ДНК в клетъчното ядро. За да направите това, преди да започнете експеримента, тъканта се отрязва и се подлага на хидролиза с разредена солна киселина. Тази стъпка е необходима за премахване на основни протеинови компоненти, които могат да попречат на откриването на ДНК.
След това тъканта се обработва с реагент на Шиф, който съдържа фуксин или негови производни. В присъствието на ДНК, реагентът на Шиф образува стабилен комплекс с нишковидни ДНК молекули, което в крайна сметка води до образуването на лилав цвят.
Степента на оцветяване зависи от количеството ДНК в клетката, което прави реакцията на Feulgen чувствителна и точна и позволява да се използва за количествен ДНК анализ.
Реакцията на Feulgen се използва широко в медицината, биологията и генетиката за определяне на съдържанието на ДНК в различни видове клетки. Този метод може да се използва например за изследване на злокачествени тумори, където промените в количеството на ДНК могат да показват наличието на ракови клетки. Може да бъде полезен и за изучаване на генома на различни организми и откриване на мутации и генетични промени.
По този начин реакцията на Feulgen е важен инструмент за изследване на клетъчната биология и генетика, който позволява да се определи наличието и количеството на ДНК в клетката. Поради своята чувствителност и точност, този метод продължава да бъде популярен сред изследователите по света.
Реакция на Feulgen за определяне на ДНК в клетките. Веществото Fölgegens е разтвор, състоящ се от няколко компонента. Крайната цел е да се открие и измери количеството ДНК в тъканта. Основният метод за подготовка на клетки се основава на процедурата за фиксиране, описана в раздел 3.3.1.
Когато тъканна проба се отвори и разреди с голямо количество киселина, тя разгражда колагена, присъстващ в тъканната матрица, за да освободи клетки, които могат да се използват за анализ. Някои изследвания оценяват тъканната фиксация с помощта на оптична микроскопия, други оценяват наличието на клетъчна жизнеспособност в материала след фиксиращия ефект на лекарството. И накрая, в случай на криохистология, клетките се фиксират при субнуклеарни условия като сканиране чрез замразяване.
След фиксиране нефиксираните клетки се оцветяват с реагенти на Schiff с киселинен детергент. Оцветяването с йод или толуидиново синьо може да придружава реакцията на Föhl