Feulgen reakció

A Feulgen-reakció egy módszer a DNS jelenlétének meghatározására a sejtmagban, amelyet 1924-ben Robert Feulgen német biológus dolgozott ki. Ez a módszer az egyik legáltalánosabb és legpontosabb módszer a DNS jelenlétének meghatározására a sejtekben.

A Feulgen-reakció eljárása egy szövetmetszet elkészítésével kezdődik, amelyet ezután híg sósavval hidrolizálnak. Ez fehérje denaturálódásához és DNS hidrolízishez vezet a sejtmagban. A metszetet ezután Schiff-reagenssel kezelik, amely kölcsönhatásba lép a sejtmagban maradó dezoxiribonukleotidokkal, stabil komplexet képezve.

A reakció eredményeként a sejtmagban lévő dezoxiribonukleotidok mély lila színűvé válnak. Ugyanakkor a folt színe a sejtben lévő DNS mennyiségétől függ.

A Feulgen-reakciónak számos alkalmazása van a biológiai kutatásban. Használható különféle sejttípusok DNS-tartalmának meghatározására, valamint sejtciklus-jellemzők és DNS-mutációk tanulmányozására.

Ezenkívül a Feulgen-reakció módszere fontos eszköz a DNS-rendellenességekkel kapcsolatos betegségek, például a rák és a genetikai rendellenességek diagnosztizálására.

Így a Feulgen-reakció a biológiai kutatás egyik fontos módszere, amely lehetővé teszi a DNS jelenlétének meghatározását a sejtekben, és ezen információk felhasználását betegségek diagnosztizálására és tanulmányozására.

A Feulgen-reakció az egyik leggyakoribb módszer a DNS sejtekben való jelenlétének meghatározására. A módszert Robert Feulgen német biológus dolgozta ki 1914-ben, és továbbra is a sejtbiológiai kutatások fontos eszköze.

A Feulgen-reakció alapötlete az, hogy Schiff-reagenst használnak a DNS megfestésére a sejtmagban. Ehhez a kísérlet megkezdése előtt a szövetet levágjuk, és híg sósavval hidrolízisnek vetjük alá. Ez a lépés szükséges a főbb fehérjekomponensek eltávolításához, amelyek zavarhatják a DNS kimutatását.

Ezután a szövetet Schiff-reagenssel kezelik, amely fukszint vagy származékait tartalmazza. DNS jelenlétében a Schiff-reagens stabil komplexet képez fonalas DNS-molekulákkal, ami végső soron lila szín kialakulását eredményezi.

A szín mértéke a sejtben lévő DNS mennyiségétől függ, ami a Feulgen-reakciót érzékennyé és pontossá teszi, és lehetővé teszi kvantitatív DNS-analízishez való felhasználását.

A Feulgen-reakciót széles körben használják az orvostudományban, a biológiában és a genetikában a különböző típusú sejtek DNS-tartalmának meghatározására. Ez a módszer használható például rosszindulatú daganatok vizsgálatára, ahol a DNS mennyiségének változása rákos sejtek jelenlétére utalhat. Hasznos lehet különféle organizmusok genomjának tanulmányozására, mutációk és genetikai változások kimutatására is.

Így a Feulgen-reakció a sejtbiológia és -genetika tanulmányozásának fontos eszköze, amely lehetővé teszi a DNS jelenlétének és mennyiségének meghatározását egy sejtben. Érzékenységének és pontosságának köszönhetően ez a módszer továbbra is népszerű a kutatók körében világszerte.

Feulgen reakciója a DNS meghatározására sejtekben. A Fölgegens anyag több komponensből álló oldat. A végső cél a DNS kimutatása és mérése a szövetekben. A sejt-előkészítés alapvető módszere a 3.3.1. pontban leírt rögzítési eljáráson alapul.

Ha egy szövetmintát kinyitnak és nagy mennyiségű savval hígítanak, az lebontja a szöveti mátrixban jelenlévő kollagént, és olyan sejtek szabadulnak fel, amelyek elemzésre használhatók. Egyes tanulmányok a szövetrögzítést optikai mikroszkóppal értékelik, mások a sejtek életképességének jelenlétét értékelik az anyagban a gyógyszer fixáló hatása után. Végül a kriohisztológia esetében a sejteket szubnukleáris körülmények között rögzítik, például fagyasztva szkenneléssel.

A rögzítés után a nem rögzített sejteket savas detergens Schiff-reagensekkel festjük. Jód vagy toluidin kék festés kísérheti a Föhl-reakciót