Reakcja Feulgena

Reakcja Feulgena to metoda oznaczania obecności DNA w jądrze komórkowym, opracowana w 1924 roku przez niemieckiego biologa Roberta Feulgena. Metoda ta jest jedną z najpowszechniejszych i najdokładniejszych metod określania obecności DNA w komórkach.

Procedura reakcji Feulgena rozpoczyna się od przygotowania wycinka tkanki, który następnie hydrolizuje się rozcieńczonym kwasem solnym. Prowadzi to do denaturacji białek i hydrolizy DNA w jądrze komórkowym. Następnie skrawek poddaje się działaniu odczynnika Schiffa, który oddziałuje z dezoksyrybonukleotydami pozostałymi w jądrze komórkowym, tworząc stabilny kompleks.

W wyniku tej reakcji dezoksyrybonukleotydy w jądrze komórkowym przybierają ciemnofioletowy kolor. Jednocześnie kolor plamy zależy od ilości DNA w komórce.

Reakcja Feulgena ma wiele zastosowań w badaniach biologicznych. Można go wykorzystać do określenia zawartości DNA różnych typów komórek, a także do badania charakterystyki cyklu komórkowego i mutacji DNA.

Ponadto metoda reakcji Feulgena jest ważnym narzędziem w diagnostyce chorób związanych z zaburzeniami DNA, takimi jak nowotwory i zaburzenia genetyczne.

Zatem reakcja Feulgena jest ważną metodą w badaniach biologicznych, która pozwala określić obecność DNA w komórkach i wykorzystać tę informację do diagnozowania i badania chorób.

Reakcja Feulgena jest jedną z najpowszechniejszych metod określania obecności DNA w komórkach. Metoda została opracowana przez niemieckiego biologa Roberta Feulgena w 1914 roku i pozostaje ważnym narzędziem w badaniach z zakresu biologii komórki.

Podstawową ideą reakcji Feulgena jest użycie odczynnika Schiffa do barwienia DNA w jądrze komórkowym. W tym celu przed rozpoczęciem doświadczenia tkankę odcina się i poddaje hydrolizie rozcieńczonym kwasem solnym. Ten etap jest niezbędny do usunięcia głównych składników białkowych, które mogą zakłócać wykrywanie DNA.

Następnie tkaninę poddaje się działaniu odczynnika Schiffa zawierającego fuksynę lub jej pochodne. W obecności DNA odczynnik Schiffa tworzy stabilny kompleks z nitkowatymi cząsteczkami DNA, co ostatecznie skutkuje powstaniem fioletowego zabarwienia.

Stopień zabarwienia zależy od ilości DNA w komórce, co sprawia, że ​​reakcja Feulgena jest czuła i dokładna oraz pozwala na wykorzystanie jej do ilościowej analizy DNA.

Reakcja Feulgena jest szeroko stosowana w medycynie, biologii i genetyce do określenia zawartości DNA w różnych typach komórek. Metodę tę można zastosować np. do badania nowotworów złośliwych, gdzie zmiany w ilości DNA mogą wskazywać na obecność komórek nowotworowych. Może być również przydatny do badania genomu różnych organizmów oraz wykrywania mutacji i zmian genetycznych.

Zatem reakcja Feulgena jest ważnym narzędziem do badań biologii i genetyki komórki, które pozwala określić obecność i ilość DNA w komórce. Metoda ta, ze względu na swoją czułość i dokładność, cieszy się nadal dużą popularnością wśród badaczy na całym świecie.

Reakcja Feulgena do oznaczania DNA w komórkach. Substancja Fölgegens jest roztworem składającym się z kilku składników. Ostatecznym celem jest wykrycie i zmierzenie ilości DNA w tkance. Podstawowa metoda przygotowania komórek opiera się na procedurze utrwalania opisanej w rozdziale 3.3.1.

Kiedy próbka tkanki zostanie otwarta i rozcieńczona dużą ilością kwasu, rozkłada ona kolagen obecny w macierzy tkankowej, uwalniając komórki, które można wykorzystać do analizy. Niektóre badania oceniają utrwalenie tkanki za pomocą mikroskopii optycznej, inne oceniają obecność żywotności komórek w materiale po działaniu utrwalającym leku. Wreszcie, w przypadku kriohistologii, komórki utrwala się w warunkach podjądrowych, takich jak skanowanie zamrażające.

Po utrwaleniu nieutrwalone komórki barwi się odczynnikami Schiffa z detergentem kwasowym. Reakcji Föhla może towarzyszyć barwienie błękitem jodowym lub toluidynowym