Feulgenin reaktio

Feulgen-reaktio on menetelmä DNA:n läsnäolon määrittämiseksi soluytimessä, jonka saksalainen biologi Robert Feulgen kehitti vuonna 1924. Tämä menetelmä on yksi yleisimmistä ja tarkimmista tavoista määrittää DNA:n läsnäolo soluissa.

Feulgen-reaktiomenettely alkaa kudosleikkeen valmistamisella, joka sitten hydrolysoidaan laimealla kloorivetyhapolla. Tämä johtaa proteiinien denaturoitumiseen ja DNA:n hydrolyysiin soluytimessä. Leikkaus käsitellään sitten Schiffin reagenssilla, joka on vuorovaikutuksessa soluytimeen jäävien deoksiribonukleotidien kanssa muodostaen stabiilin kompleksin.

Tämän reaktion seurauksena solun ytimessä olevat deoksiribonukleotidit muuttuvat syvän violetiksi. Samaan aikaan tahran väri riippuu DNA:n määrästä solussa.

Feulgen-reaktiolla on monia sovelluksia biologisessa tutkimuksessa. Sen avulla voidaan määrittää eri solutyyppien DNA-pitoisuutta sekä tutkia solusyklin ominaisuuksia ja DNA-mutaatioita.

Lisäksi Feulgen-reaktiomenetelmä on tärkeä työkalu DNA-häiriöihin liittyvien sairauksien, kuten syövän ja geneettisten häiriöiden, diagnosoinnissa.

Siten Feulgen-reaktio on tärkeä menetelmä biologisessa tutkimuksessa, jonka avulla voidaan määrittää DNA:n esiintyminen soluissa ja käyttää tätä tietoa sairauksien diagnosointiin ja tutkimiseen.

Feulgen-reaktio on yksi yleisimmistä menetelmistä DNA:n läsnäolon määrittämiseksi soluissa. Menetelmän kehitti saksalainen biologi Robert Feulgen vuonna 1914, ja se on edelleen tärkeä työkalu solubiologian tutkimuksessa.

Feulgen-reaktion perusideana on käyttää Schiffin reagenssia DNA:n värjäämiseen solun ytimessä. Tätä varten kudos leikataan ennen kokeen aloittamista ja hydrolysoidaan laimealla kloorivetyhapolla. Tämä vaihe on välttämätön tärkeimpien proteiinikomponenttien poistamiseksi, jotka voivat häiritä DNA:n havaitsemista.

Seuraavaksi kangas käsitellään Schiffin reagenssilla, joka sisältää fuksiinia tai sen johdannaisia. DNA:n läsnä ollessa Schiffin reagenssi muodostaa stabiilin kompleksin rihmamaisten DNA-molekyylien kanssa, mikä lopulta johtaa violetin värin muodostumiseen.

Värin aste riippuu DNA:n määrästä solussa, mikä tekee Feulgen-reaktiosta herkän ja tarkan ja mahdollistaa sen käytön kvantitatiiviseen DNA-analyysiin.

Feulgen-reaktiota käytetään laajasti lääketieteessä, biologiassa ja genetiikassa DNA-sisällön määrittämiseen erityyppisissä soluissa. Tällä menetelmällä voidaan tutkia esimerkiksi pahanlaatuisia kasvaimia, joissa DNA-määrän muutokset voivat viitata syöpäsolujen esiintymiseen. Se voi olla hyödyllinen myös erilaisten organismien genomin tutkimiseen sekä mutaatioiden ja geneettisten muutosten havaitsemiseen.

Siten Feulgen-reaktio on tärkeä työkalu solubiologian ja genetiikan tutkimuksessa, jonka avulla voidaan määrittää DNA:n läsnäolo ja määrä solussa. Herkkyytensä ja tarkkuutensa ansiosta tämä menetelmä on edelleen suosittu tutkijoiden keskuudessa ympäri maailmaa.

Feulgenin reaktio DNA:n määrittämiseen soluissa. Fölgegens-aine on useista komponenteista koostuva liuos. Lopullisena tavoitteena on havaita ja mitata DNA:n määrä kudoksessa. Solujen valmistelun perusmenetelmä perustuu kohdassa 3.3.1 kuvattuun kiinnitysmenettelyyn.

Kun kudosnäyte avataan ja laimennetaan suurella määrällä happoa, se hajottaa kudosmatriisissa olevan kollageenin vapauttaen soluja, joita voidaan käyttää analysointiin. Jotkut tutkimukset arvioivat kudoksen kiinnittymistä optisella mikroskopialla, toiset arvioivat solujen elinkelpoisuuden läsnäoloa materiaalissa lääkkeen kiinnittävän vaikutuksen jälkeen. Lopuksi, kryohistologian tapauksessa solut kiinnitetään subnukleaarisissa olosuhteissa, kuten jäädytysskannaus.

Kiinnittämisen jälkeen kiinnittämättömät solut värjätään happamilla detergentti-Schiff-reagensseilla. Jodi- tai toluidiinisininen värjäytyminen voi liittyä Föhl-reaktioon