Réaction à la ninhydrine

**La réaction à la ninhydrine (HNR)** est une méthode permettant de déterminer la présence ou l'absence d'une liaison amide primaire ou secondaire dans les protéines et autres composés organiques. La réaction est basée sur la capacité de la ninhydrine, une forme oxydée de l’oxyde d’amine N-chlorosuccinimide (NCS), à former des complexes colorés avec les acides aminés et leurs dérivés. Si des groupes amino sont présents dans une molécule d'une protéine ou d'un autre composé organique, ils se condenseront avec la ninhydrine, formant un composé coloré avec une certaine nuance. Par conséquent, la réaction à la ninhydrine est utilisée pour déterminer les caractéristiques structurelles des protéines et pour analyser la dynamique et la pureté des réactifs dans les systèmes biologiques.

Pour réaliser la réaction de la ninhydrine, les étapes suivantes doivent être suivies :

1. Préparez une solution de ninhydrine et ajoutez-la à l’échantillon à tester. 2. Remuez le contenu de la solution pendant un certain temps. 3. Laissez le mélange agir plusieurs heures ou jours – cela dépend des instructions spécifiques. 4. Évaluez la couleur résultante de la solution et comparez-la avec le motif typique sur les échantillons où le groupe amino est présent ou absent. Les avantages de l'utilisation de la méthode à la ninhydrine par rapport aux autres méthodes basées sur la détection de l'acidité résiduelle (par exemple la méthode Sholl) sont les suivants :

- L'eutrophisation de la plupart des échantillons ne permet dans la plupart des cas pas de les examiner optiquement, même avec des temps d'immersion plus longs dans le solvant. En utilisant la méthode au ninhydrogène, vous pouvez éviter les problèmes liés à la dilution et à l'acidification parallèle de la solution avant de mener l'étude. - Le résultat des méthodes de recherche spectrophotométriques est uniquement la mesure des acides résiduels. Ainsi, l'information sur la présence d'amides est obtenue indirectement, et la valeur ainsi obtenue peut ne pas être directement corrélée à la quantité d'amides détectée. Cet inconvénient est plus caractéristique de la méthode standard, la méthode Sholl, que de la réaction au ninhydrogène, qui présente un net avantage lors de l'étude d'échantillons à forte teneur en produits azotés résiduels. C'est le résultat obtenu avec le ninhydrène qui donne au spécialiste une idée soit de la qualité du produit qu'il a reçu (et il augmentera alors la température d'hydrolyse), soit du fait que le produit obtenu ne contient pas d'amides et donc ne contient pas d'amides. besoin d'éclaircissements. Certains sels contenant des groupes amide, par exemple le cyclohexanol indoxyle de sodium, ont une absorption native suffisante dans la région ultraviolette à des longueurs d'onde de 208 à 270 nm. Des résultats quantitatifs suffisamment précis sur de tels groupes peuvent être obtenus par absorption à haute résolution ou