Нингидринная Реакция

**Нингидринная реакция (HNR)** - это метод определения наличия или отсутствия первичной или вторичной амидной связи в белках и других органических соединениях. В основе реакции лежит способность нингидрина, окисленной формы аминоксида N-хлорсукцинимида (NCS), образовывать цветные комплексные соединения с аминокислотами и их производными. Если в молекуле белка или другого органического соединения присутствуют аминогруппы, то они будут конденсироваться с нингидрином, образуя цветное соединение с определенным оттенком. Поэтому нингидринную реакцию используют для определения структурных особенностей белков и для анализа динамики и чистоты реагентов в биологических системах.

Для проведения нингидринной реакции необходимо выполнить следующие шаги:

1. Приготовить раствор нингидрина и добавить его к исследуемому образцу. 2. Перемешивать содержимое раствора на протяжении определенного времени. 3. Оставить смесь на несколько часов или дней – это зависит от конкретной инструкции. 4. Оценить полученный цвет раствора и сравнить его с типичной картиной на образцах, где аминогруппа присутствует или отсутствует. Преимущества использования нингидринного метода перед другими методами, основанными на обнаружении остаточной кислотностей (например, методом Шолла), заключаются в следующем:

- Эвтрофикация большинства образцов в большинстве случаев не позволяет исследовать их оптически даже при применении более длительного времени погружения в растворитель. С помощью нингидренного метода можно избежать проблем, связанных с разведением и параллельным закислением раствора перед проведением исследования. - Результатом спектрофотометрических методов исследования является только измерение остаточных кислот. Таким образом, информация о наличии амидов получается косвенным путём, а полученная таким образом величина может быть прямо несоотнесена с количеством обнаруженных амидов. Такой недостаток в большей мере свойственен стандартному методу, методу Шолла, чем нингидренной реакции, которая имеет явное преимущество при исследовании проб с высоким содержанием остаточных азотсодержащих продуктов. Именно результат, получаемый с помощью нингидрена, даёт специалисту представление либо о том, насколько качественный продукт он получил (и тогда он будет повышать температуру гидролиза), либо о том что его полученный продукт не содержит амидов и значит не нуждается в осветлении. Некоторые соли, содержащие амидные группы, например, натриевая соль циклогексанола индоксила, обладают достаточным нативным поглощением в ультрафиолетовой области при длине волны от 208 до 270 нм. Достаточно точные количественные результаты на таких группах могут быть получены методом высокоразрешающей абсорбции или