Нінгідринна реакція

**Нінгідринна реакція (HNR)** - це метод визначення наявності або відсутності первинного або вторинного амідного зв'язку в білках та інших органічних сполуках. В основі реакції лежить здатність нінгідрину, окисленої форми аміноксиду N-хлорсукциніміду (NCS), утворювати кольорові комплексні сполуки з амінокислотами та їх похідними. Якщо в молекулі білка або іншої органічної сполуки присутні аміногрупи, то вони конденсуватимуться з нінгідрином, утворюючи кольорове з'єднання з певним відтінком. Тому нингидринную реакцію використовують визначення структурних особливостей білків й у аналізу динаміки і чистоти реагентів в біологічних системах.

Для проведення нінгідринної реакції необхідно виконати такі кроки:

1. Приготувати розчин нінгідрину та додати його до досліджуваного зразка. 2. Перемішувати вміст розчину протягом певного часу. 3. Залишити суміш на кілька годин або днів – це залежить від конкретної інструкції. 4. Оцінити отриманий колір розчину та порівняти його з типовою картиною на зразках, де аміногрупа присутня чи відсутня. Переваги використання нінгідринного методу перед іншими методами, заснованими на виявленні залишкової кислотності (наприклад, методом Шолла), полягають у наступному:

- Евтрофікація більшості зразків у більшості випадків не дозволяє досліджувати їх оптично навіть при застосуванні тривалішого часу занурення у розчинник. За допомогою нінгідренного методу можна уникнути проблем, пов'язаних з розведенням та паралельним закисленням розчину перед проведенням дослідження. - Результатом спектрофотометричних методів дослідження є лише вимір залишкових кислот. Таким чином, інформація про наявність амідів виходить непрямим шляхом, а отримана таким чином величина може бути прямо не співвіднесена з кількістю виявлених амідів. Такий недолік більшою мірою властивий стандартному методу, методу Шолла, ніж нингидренной реакції, яка має явну перевагу при дослідженні проб з високим вмістом залишкових азотовмісних продуктів. Саме результат, одержуваний за допомогою нінгідрену, дає фахівцеві уявлення або про те, наскільки якісний продукт він отримав (і тоді він буде підвищувати температуру гідролізу), або про те, що його отриманий продукт не містить амідів і не потребує освітлення. Деякі солі, що містять амідні групи, наприклад, натрієва сіль циклогексанолу індоксилу, мають достатнє нативне поглинання в ультрафіолетовій ділянці при довжині хвилі від 208 до 270 нм. Достатньо точні кількісні результати на таких групах можуть бути отримані методом високодозвільної абсорбції або