Ninhidrin reakció

A **Ninhidrin-reakció (HNR)** egy módszer a primer vagy szekunder amidkötés jelenlétének vagy hiányának meghatározására fehérjékben és más szerves vegyületekben. A reakció a ninhidrinnek, az amin-oxid N-klór-szukcinimid (NCS) oxidált formájának azon képességén alapul, hogy aminosavakkal és származékaikkal színes komplexeket képez. Ha aminocsoportok vannak jelen egy fehérje vagy más szerves vegyület molekulájában, akkor ezek a ninhidrinnel kondenzálódnak, és egy bizonyos árnyalatú színes vegyületet képeznek. Ezért a ninhidrin reakciót a fehérjék szerkezeti jellemzőinek meghatározására, valamint a reagensek dinamikájának és tisztaságának elemzésére használják biológiai rendszerekben.

A ninhidrin reakció végrehajtásához a következő lépéseket kell követni:

1. Készítsünk ninhidrin oldatot, és adjuk a vizsgált mintához. 2. Keverje meg az oldat tartalmát egy bizonyos ideig. 3. Hagyja a keveréket több órán vagy napig - ez a konkrét utasításoktól függ. 4. Értékelje az oldat kapott színét, és hasonlítsa össze a minták tipikus mintázatával, ahol az aminocsoport jelen van vagy hiányzik. A ninhidrin módszer alkalmazásának előnyei a maradék savasság kimutatásán alapuló egyéb módszerekkel szemben (például a Sholl-módszer) a következők:

- A legtöbb minta eutrofizációja a legtöbb esetben nem teszi lehetővé optikai vizsgálatukat, még hosszabb oldószeres merítési idő esetén sem. A ninhidrogén módszerrel elkerülheti az oldat hígításával és párhuzamos savasításával kapcsolatos problémákat a vizsgálat elvégzése előtt. - A spektrofotometriás kutatási módszerek eredménye csak a maradék savak mérése. Így az amidok jelenlétéről indirekt módon kapunk információt, és az így kapott érték nem feltétlenül korrelál közvetlenül a kimutatott amidok mennyiségével. Ez a hátrány inkább a standard módszerre, a Sholl-módszerre jellemző, mint a ninhidrogénreakcióra, amelynek egyértelmű előnye van a magas maradék nitrogéntartalmú termékek vizsgálatánál. A ninhidrénnel kapott eredmény az, ami képet ad a szakembernek arról, hogy milyen minőségű terméket kapott (és akkor növeli a hidrolízis hőmérsékletét), vagy hogy a kapott termék nem tartalmaz amidot, ezért nem. pontosításra szorul. Egyes amidcsoportokat tartalmazó sók, például nátrium-ciklohexanol-indoxil, elegendő natív abszorpcióval rendelkeznek az ultraibolya tartományban 208-270 nm hullámhosszon. Az ilyen csoportokon kellően pontos kvantitatív eredményeket kaphatunk nagy felbontású abszorpcióval ill.