Ninhidrin Reaksiyonu

**Ninhidrin reaksiyonu (HNR)**, proteinlerde ve diğer organik bileşiklerde birincil veya ikincil amid bağının varlığını veya yokluğunu belirlemeye yönelik bir yöntemdir. Reaksiyon, amin oksit N-klorosüksinimitin (NCS) oksitlenmiş bir formu olan ninhidrinin, amino asitler ve türevleri ile renkli kompleksler oluşturma yeteneğine dayanmaktadır. Bir protein molekülünde veya başka bir organik bileşikte amino grupları mevcutsa, bunlar ninhidrin ile yoğunlaşarak belirli bir tonda renkli bir bileşik oluşturur. Bu nedenle ninhidrin reaksiyonu, proteinlerin yapısal özelliklerini belirlemek ve biyolojik sistemlerdeki reaktiflerin dinamiklerini ve saflığını analiz etmek için kullanılır.

Ninhidrin reaksiyonunu gerçekleştirmek için aşağıdaki adımlar izlenmelidir:

1. Bir ninhidrin çözeltisi hazırlayın ve bunu test örneğine ekleyin. 2. Solüsyonun içeriğini belirli bir süre karıştırın. 3. Karışımı birkaç saat veya gün bekletin; bu, özel talimatlara bağlıdır. 4. Solüsyonun ortaya çıkan rengini değerlendirin ve bunu, amino grubunun mevcut olduğu veya bulunmadığı numunelerdeki tipik desenle karşılaştırın. Ninhidrin yöntemini kullanmanın, artık asitliğin tespitine dayalı diğer yöntemlere (örneğin Sholl yöntemi) göre avantajları şunlardır:

- Çoğu numunenin ötrofikasyonu çoğu durumda, solvente daha uzun daldırma süreleri olsa bile bunların optik olarak incelenmesine izin vermez. Ninhidrojen yöntemini kullanarak, çalışmayı yürütmeden önce çözeltinin seyreltilmesi ve paralel asitleştirilmesiyle ilgili sorunları önleyebilirsiniz. - Spektrofotometrik araştırma yöntemlerinin sonucu yalnızca artık asitlerin ölçümüdür. Dolayısıyla amidlerin varlığına ilişkin bilgi dolaylı olarak elde edilir ve bu şekilde elde edilen değer, tespit edilen amid miktarıyla doğrudan ilişkili olmayabilir. Bu dezavantaj, yüksek miktarda artık nitrojen içeren ürün içeriğine sahip örnekleri incelerken açık bir avantaja sahip olan ninhidrojen reaksiyonundan ziyade standart yöntem olan Sholl yönteminin daha karakteristik özelliğidir. Uzmana, aldığı ürünün ne kadar kaliteli olduğu (ve daha sonra hidroliz sıcaklığını artıracağı) veya elde edilen ürünün amid içermediği ve dolayısıyla açıklama gerekli. Amit grupları içeren bazı tuzlar, örneğin sodyum sikloheksanol indoksil, 208 ila 270 nm dalga boylarında ultraviyole bölgede yeterli doğal absorpsiyona sahiptir. Bu tür gruplar üzerinde yeterince doğru niceliksel sonuçlar, yüksek çözünürlüklü absorpsiyon veya