Ninhydrinreaktion

**Ninhydrinreaktion (HNR)** är en metod för att bestämma närvaron eller frånvaron av en primär eller sekundär amidbindning i proteiner och andra organiska föreningar. Reaktionen är baserad på förmågan hos ninhydrin, en oxiderad form av aminoxiden N-klorsuccinimid (NCS), att bilda färgade komplex med aminosyror och deras derivat. Om aminogrupper finns i en molekyl av ett protein eller annan organisk förening, kommer de att kondensera med ninhydrin och bilda en färgad förening med en viss nyans. Därför används ninhydrinreaktionen för att bestämma de strukturella egenskaperna hos proteiner och för att analysera dynamiken och renheten hos reagenser i biologiska system.

För att utföra ninhydrinreaktionen måste följande steg följas:

1. Bered en lösning av ninhydrin och tillsätt den till testprovet. 2. Rör om innehållet i lösningen under en viss tid. 3. Låt blandningen stå i flera timmar eller dagar - det beror på de specifika instruktionerna. 4. Utvärdera den resulterande färgen på lösningen och jämför den med det typiska mönstret på prover där aminogruppen finns eller saknas. Fördelarna med att använda ninhydrinmetoden jämfört med andra metoder baserade på detektering av kvarvarande surhet (till exempel Sholl-metoden) är följande:

- Övergödningen av de flesta prover tillåter i de flesta fall inte att de kan undersökas optiskt, även med längre nedsänkningstider i lösningsmedlet. Genom att använda ninvätemetoden kan du undvika problem i samband med utspädning och parallell försurning av lösningen innan du genomför studien. – Resultatet av spektrofotometriska forskningsmetoder är bara mätning av restsyror. Således erhålls information om förekomsten av amider indirekt, och det sålunda erhållna värdet kanske inte är direkt korrelerat med mängden detekterade amider. Denna nackdel är mer utmärkande för standardmetoden, Sholl-metoden, än för nineväte-reaktionen, som har en klar fördel när man studerar prover med hög halt av restkvävehaltiga produkter. Det är resultatet som erhållits med ninhydren som ger specialisten en uppfattning om hur hög kvalitet produkten han har fått (och då kommer han att öka hydrolystemperaturen), eller att hans resulterande produkt inte innehåller amider och därför inte behöver förtydligande. Vissa salter innehållande amidgrupper, till exempel natriumcyklohexanolindoxyl, har tillräcklig naturlig absorption i det ultravioletta området vid våglängder från 208 till 270 nm. Tillräckligt exakta kvantitativa resultat på sådana grupper kan erhållas genom högupplöst absorption eller