Ninhydrinreaksjon

**Ninhydrinreaksjon (HNR)** er en metode for å bestemme tilstedeværelse eller fravær av en primær eller sekundær amidbinding i proteiner og andre organiske forbindelser. Reaksjonen er basert på evnen til ninhydrin, en oksidert form av aminoksidet N-klorsuccinimid (NCS), til å danne fargede komplekser med aminosyrer og deres derivater. Hvis aminogrupper er tilstede i et molekyl av et protein eller en annen organisk forbindelse, vil de kondensere med ninhydrin, og danne en farget forbindelse med en viss nyanse. Derfor brukes ninhydrinreaksjonen til å bestemme strukturelle egenskaper til proteiner og analysere dynamikken og renheten til reagenser i biologiske systemer.

For å utføre ninhydrinreaksjonen må følgende trinn følges:

1. Forbered en løsning av ninhydrin og tilsett den til testprøven. 2. Rør innholdet i løsningen i en viss tid. 3. La blandingen stå i flere timer eller dager - det avhenger av de spesifikke instruksjonene. 4. Vurder den resulterende fargen på løsningen og sammenlign den med det typiske mønsteret på prøver der aminogruppen er tilstede eller fraværende. Fordelene ved å bruke ninhydrin-metoden fremfor andre metoder basert på påvisning av gjenværende surhet (for eksempel Sholl-metoden) er som følger:

- Eutrofieringen av de fleste prøvene gjør at de i de fleste tilfeller ikke kan undersøkes optisk, selv med lengre nedsenkingstid i løsemidlet. Ved å bruke ninhydrogenmetoden kan man unngå problemer knyttet til fortynning og parallell forsuring av løsningen før man gjennomfører studien. – Resultatet av spektrofotometriske forskningsmetoder er kun måling av restsyrer. Dermed oppnås informasjon om tilstedeværelsen av amider indirekte, og verdien som oppnås på denne måten er kanskje ikke direkte korrelert med mengden amider som er påvist. Denne ulempen er mer karakteristisk for standardmetoden, Sholl-metoden, enn for ninhydrogenreaksjonen, som har en klar fordel når man studerer prøver med høyt innhold av restnitrogenholdige produkter. Det er resultatet oppnådd med ninhydren som gir spesialisten en ide om hvor høy kvalitet produktet han har mottatt (og da vil han øke hydrolysetemperaturen), eller at det resulterende produktet ikke inneholder amider og derfor ikke trenger avklaring. Noen salter som inneholder amidgrupper, for eksempel natriumcykloheksanolindoksyl, har tilstrekkelig naturlig absorpsjon i det ultrafiolette området ved bølgelengder fra 208 til 270 nm. Tilstrekkelig nøyaktige kvantitative resultater på slike grupper kan oppnås ved høyoppløselig absorpsjon eller