Нинхидринова реакция

**Нинхидринова реакция (HNR)** е метод за определяне наличието или отсъствието на първична или вторична амидна връзка в протеини и други органични съединения. Реакцията се основава на способността на нинхидрин, окислена форма на аминооксида N-хлоросукцинимид (NCS), да образува оцветени комплекси с аминокиселини и техните производни. Ако аминогрупите присъстват в молекула на протеин или друго органично съединение, те ще кондензират с нинхидрин, образувайки оцветено съединение с определен нюанс. Следователно реакцията на нинхидрин се използва за определяне на структурните характеристики на протеините и за анализ на динамиката и чистотата на реагентите в биологичните системи.

За да се извърши реакцията на нинхидрин, трябва да се следват следните стъпки:

1. Пригответе разтвор на нинхидрин и го добавете към тестовата проба. 2. Разбъркайте съдържанието на разтвора за определено време. 3. Оставете сместа за няколко часа или дни - зависи от конкретните инструкции. 4. Оценете получения цвят на разтвора и го сравнете с типичния модел на проби, където аминогрупата присъства или отсъства. Предимствата на използването на метода на нинхидрин пред други методи, базирани на откриване на остатъчна киселинност (например метода на Sholl), са следните:

- Еутрофикацията на повечето проби в повечето случаи не позволява те да бъдат изследвани оптично, дори и при по-дълго време на потапяне в разтворителя. Използвайки метода на нинводород, можете да избегнете проблеми, свързани с разреждането и паралелното подкисляване на разтвора преди провеждане на изследването. - Резултатът от спектрофотометричните методи на изследване е само измерването на остатъчни киселини. По този начин информацията за наличието на амиди се получава индиректно и така получената стойност може да не е пряко свързана с количеството открити амиди. Този недостатък е по-характерен за стандартния метод, метода на Шол, отколкото за нинводородната реакция, която има ясно предимство при изследване на проби с високо съдържание на остатъчни азотсъдържащи продукти. Това е резултатът, получен с нинхидрен, който дава на специалиста представа или за това колко висококачествен е продуктът, който е получил (и тогава той ще повиши температурата на хидролиза), или че полученият му продукт не съдържа амиди и следователно не нужда от пояснение. Някои соли, съдържащи амидни групи, например натриев циклохексанол индоксил, имат достатъчна естествена абсорбция в ултравиолетовата област при дължини на вълните от 208 до 270 nm. Достатъчно точни количествени резултати за такива групи могат да бъдат получени чрез абсорбция с висока разделителна способност или