Ninhydrin reaktion

**Ninhydrinreaktion (HNR)** er en metode til at bestemme tilstedeværelsen eller fraværet af en primær eller sekundær amidbinding i proteiner og andre organiske forbindelser. Reaktionen er baseret på evnen hos ninhydrin, en oxideret form af aminoxidet N-chlorsuccinimid (NCS), til at danne farvede komplekser med aminosyrer og deres derivater. Hvis aminogrupper er til stede i et molekyle af et protein eller en anden organisk forbindelse, vil de kondensere med ninhydrin og danne en farvet forbindelse med en bestemt nuance. Derfor bruges ninhydrinreaktionen til at bestemme de strukturelle træk ved proteiner og til at analysere dynamikken og renheden af ​​reagenser i biologiske systemer.

For at udføre ninhydrinreaktionen skal følgende trin følges:

1. Forbered en opløsning af ninhydrin og tilsæt den til testprøven. 2. Rør indholdet af opløsningen i en vis tid. 3. Lad blandingen stå i flere timer eller dage - det afhænger af de specifikke instruktioner. 4. Vurder den resulterende farve på opløsningen og sammenlign den med det typiske mønster på prøver, hvor aminogruppen er til stede eller fraværende. Fordelene ved at bruge ninhydrinmetoden frem for andre metoder baseret på påvisning af resterende surhedsgrad (for eksempel Sholl-metoden) er som følger:

- Eutrofiering af de fleste prøver giver i de fleste tilfælde ikke mulighed for at undersøge dem optisk, selv med længere nedsænkningstider i opløsningsmidlet. Ved hjælp af ninhydrogen-metoden kan du undgå problemer forbundet med fortynding og parallel forsuring af opløsningen, før du udfører undersøgelsen. - Resultatet af spektrofotometriske forskningsmetoder er kun måling af resterende syrer. Information om tilstedeværelsen af ​​amider opnås således indirekte, og den således opnåede værdi er muligvis ikke direkte korreleret med mængden af ​​detekterede amider. Denne ulempe er mere karakteristisk for standardmetoden, Sholl-metoden, end for nibrintreaktionen, som har en klar fordel ved undersøgelse af prøver med et højt indhold af restkvælstofholdige produkter. Det er resultatet opnået med ninhydren, der giver specialisten en idé om, hvor høj kvalitet produktet han har modtaget (og så vil han øge hydrolysetemperaturen), eller at hans resulterende produkt ikke indeholder amider og derfor ikke brug for afklaring. Nogle salte indeholdende amidgrupper, for eksempel natriumcyclohexanolindoxyl, har tilstrækkelig naturlig absorption i det ultraviolette område ved bølgelængder fra 208 til 270 nm. Tilstrækkeligt nøjagtige kvantitative resultater på sådanne grupper kan opnås ved højopløsningsabsorption eller