Reazione alla ninidrina

**Reazione ninidrina (HNR)** è un metodo per determinare la presenza o l'assenza di un legame ammidico primario o secondario nelle proteine ​​e in altri composti organici. La reazione si basa sulla capacità della ninidrina, una forma ossidata dell'ammina ossido N-clorosuccinimide (NCS), di formare complessi colorati con aminoacidi e loro derivati. Se in una molecola di una proteina o di un altro composto organico sono presenti gruppi amminici, questi si condenseranno con la ninidrina formando un composto colorato con una certa tonalità. Pertanto, la reazione della ninidrina viene utilizzata per determinare le caratteristiche strutturali delle proteine ​​e per analizzare la dinamica e la purezza dei reagenti nei sistemi biologici.

Per eseguire la reazione della ninidrina è necessario seguire i seguenti passaggi:

1. Preparare una soluzione di ninidrina e aggiungerla al campione da testare. 2. Mescolare il contenuto della soluzione per un certo tempo. 3. Lasciare riposare la miscela per diverse ore o giorni, a seconda delle istruzioni specifiche. 4. Valutare il colore risultante della soluzione e confrontarlo con il modello tipico sui campioni in cui il gruppo amminico è presente o assente. I vantaggi dell’utilizzo del metodo della ninidrina rispetto ad altri metodi basati sulla rilevazione dell’acidità residua (ad esempio il metodo Sholl) sono i seguenti:

- L'eutrofizzazione della maggior parte dei campioni non consente nella maggior parte dei casi l'esame ottico, anche con tempi di immersione nel solvente più lunghi. Utilizzando il metodo del ninidrogeno è possibile evitare problemi associati alla diluizione e all'acidificazione parallela della soluzione prima di condurre lo studio. - Il risultato dei metodi di ricerca spettrofotometrica è solo la misurazione degli acidi residui. Pertanto, l'informazione sulla presenza di ammidi viene ottenuta indirettamente e il valore così ottenuto potrebbe non essere direttamente correlato alla quantità di ammidi rilevata. Questo svantaggio è più caratteristico del metodo standard, il metodo Sholl, che della reazione del nin-idrogeno, che presenta un chiaro vantaggio quando si studiano campioni con un elevato contenuto di prodotti contenenti azoto residuo. È il risultato ottenuto con il ninidrene che dà allo specialista un'idea sia della qualità del prodotto che ha ricevuto (e quindi aumenterà la temperatura di idrolisi), sia del fatto che il suo prodotto risultante non contiene ammidi e quindi non contiene bisogno di chiarimenti. Alcuni sali contenenti gruppi ammidici, ad esempio il sodio cicloesanolo indossile, hanno un assorbimento nativo sufficiente nella regione dell'ultravioletto a lunghezze d'onda comprese tra 208 e 270 nm. Risultati quantitativi sufficientemente accurati su tali gruppi possono essere ottenuti mediante assorbimento ad alta risoluzione o