Ninhydrine-reactie

**Ninhydrinereactie (HNR)** is een methode voor het bepalen van de aanwezigheid of afwezigheid van een primaire of secundaire amidebinding in eiwitten en andere organische verbindingen. De reactie is gebaseerd op het vermogen van ninhydrine, een geoxideerde vorm van het amineoxide N-chloorsuccinimide (NCS), om gekleurde complexen te vormen met aminozuren en hun derivaten. Als er aminogroepen aanwezig zijn in een molecuul van een eiwit of een andere organische verbinding, zullen ze condenseren met ninhydrine, waardoor een gekleurde verbinding met een bepaalde tint ontstaat. Daarom wordt de ninhydrinereactie gebruikt om de structurele kenmerken van eiwitten te bepalen en om de dynamiek en zuiverheid van reagentia in biologische systemen te analyseren.

Om de ninhydrinereactie uit te voeren, moeten de volgende stappen worden gevolgd:

1. Bereid een oplossing van ninhydrine en voeg deze toe aan het testmonster. 2. Roer de inhoud van de oplossing een bepaalde tijd door. 3. Laat het mengsel enkele uren of dagen staan ​​- het hangt af van de specifieke instructies. 4. Evalueer de resulterende kleur van de oplossing en vergelijk deze met het typische patroon op monsters waarin de aminogroep aanwezig of afwezig is. De voordelen van het gebruik van de ninhydrinemethode ten opzichte van andere methoden gebaseerd op de detectie van de resterende zuurgraad (bijvoorbeeld de Sholl-methode) zijn als volgt:

- Door de eutrofiëring van de meeste monsters kunnen ze in de meeste gevallen niet optisch worden onderzocht, zelfs niet bij langere onderdompelingstijden in het oplosmiddel. Met behulp van de ninwaterstofmethode kunt u problemen vermijden die verband houden met verdunning en parallelle verzuring van de oplossing voordat u het onderzoek uitvoert. - Het resultaat van spectrofotometrische onderzoeksmethoden is alleen het meten van resterende zuren. Informatie over de aanwezigheid van amiden wordt dus indirect verkregen en de aldus verkregen waarde hoeft niet direct gecorreleerd te zijn met de hoeveelheid gedetecteerde amiden. Dit nadeel is meer kenmerkend voor de standaardmethode, de Sholl-methode, dan voor de ninwaterstofreactie, die een duidelijk voordeel heeft bij het bestuderen van monsters met een hoog gehalte aan reststikstofhoudende producten. Het is het resultaat verkregen met ninhydreen dat de specialist een idee geeft van de kwaliteit van het product dat hij heeft ontvangen (en dan zal hij de hydrolysetemperatuur verhogen), of dat zijn resulterende product geen amiden bevat en daarom niet verduidelijking nodig. Sommige zouten die amidegroepen bevatten, bijvoorbeeld natriumcyclohexanol-indoxyl, hebben voldoende natuurlijke absorptie in het ultraviolette gebied bij golflengten van 208 tot 270 nm. Voldoende nauwkeurige kwantitatieve resultaten voor dergelijke groepen kunnen worden verkregen door absorptie met hoge resolutie